储存脑脊液如何用于神经系统疾病生物标志物分析

2017-05-23 20:21:00 来源:
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脑脊液能够反应神经系统疾病的病理生理变化,对神经保护措施和生物标记物的研究非常必要。因此,脑脊液生物样本库与神经系统疾病的发现生物标记物及疾病评估密切相干。

生物样本库保存脑脊液的1个重要方面是质控,这对延续的患者随访和各研究中心之间样本交换10分必要。通过系统性地研究以阐明不同前处理和储存对脑脊液中大量蛋白的影响是重要和必要的。

加强国际网络合作和严格使用标准化操作流程是脑脊液样本库的重要特点。在本文中提到的也是当前采取的脑脊液及血液样本的收集和储存标准流程使得大范围在病例及比较中研究生物标记物成为可能。

总之,多个中心间的合作和努力使得神经疾病的生物标记物研究已迈入新时期。生物样本库的标准化流程包括样本搜集、质量控制和公道选取生物标记物研究中的对比组,极大地提高了生物标记物研究的质量。

在各种急性和慢性神经系统疾病中,脑脊液能够反应大脑特殊的病理生理学进程,检测和量化其中的多种分子对疾病的诊疗起侧重要作用,有报导表明,对脑脊液中淀粉样β蛋白、微管相干总tau蛋白及磷酸化的tau蛋白的检测能够辨别阿尔兹海默病和非阿尔兹海默病的老年痴呆。本文主要讨论了脑脊液保存的特点,包括完善患者电子病历及与数据库的连接、2维码标签利用的重要性、实行自动化检索和前处理因素对脑脊液的影响。

以下几点是可能对的脑脊液前处理产生影响的因素:

1.与患者相干因素。

包括患者在样本收集当日禁食、吸烟、饮酒、咖啡因摄取量和锻炼等因素,这些因素可能影响脑脊液中生物标志物的含量;

2.实验室处理因素。

脑脊液和配对血液搜集、标号、处理进程、脑脊液、血液

搜集步骤

1、搜集和储存时间;记录搜集的时间和日期;

2、建议收集量:最少12ml,第1⑵ml用于常规CSF检测。后10ml用于储存,10mlEDTA处理的血浆;10ml血清;

3、穿刺部位:L3-L5椎间隙,血管

4、血液污染:放弃被血细胞污染的CSF。血液细胞污染的标准为:500个/ul。记录用于诊断样本中的血细胞数量;

5、穿刺针型号:无创伤,储存脑脊液如何用于神经系统疾病生物标志物分析,标准型号:21⑵3G;

6、收集管型号:型号为大于10ml的旋盖聚乙烯胺搜集管,血清:无凝血激活剂或凝胶,EDTA血浆:无蛋白酶抑制剂;

7、其他应同时搜集的体液标本:血清;

8、其他应同时搜集的体液标本:血浆:EDTA(优于柠檬酸)处理。

保存前处理

9、冻存前收藏温度;离心及离心前、后均置于室温中;

10、离心:2000g(1800⑵000),10min,室温离心;

11、修正案草案修改后:30⑹0min,最长不超过2h。离心后样本应当立即分装冻存,间隔时间不超过2h;30⑹0min,最长不超过2h;用于蛋白组学研究的样品离心后1h内处理。血清凝血最少需要30min。

12、分装管型号:修正案草案修改了与全灵2ml分装用于常规检测,1ml分装于样本库)并记录厂家;

13、分装份数:最少分装2管。建议的研究用量为10ml,因此分装份数最少大于10份;

14、每管分装量:每份最少许为0.1ml,具体参照分装管型号(0.2ml、0,储存脑脊液如何用于神经系统疾病生物标志物分析,5ml、1ml),管内贮存量为整体积75%;

15、编码:修正法草案规定,具有相应专业技术人员、设施装备、伦理审查机构和管理制度的医疗;

16、冻存温度:⑻0℃。

目前,ISBER及生物样本库科学工作小组对当前生物样本库质控进行总结。研究发现前处理差异可能影响血液中某些酶活性,但这些研究都需要反复论证和实验。由于脑脊液中蛋白丰度较低乃至低于常规检测方法的检测阈值,这使得很少的方法能够用于脑脊液生物标记物的检测。

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