如何检测感染细菌数目

自从1673年列文虎克用他自己制造的显微镜视察到了被他称为“小动物animalcules”的微生物世界以后，生物学进入了微生物阶段。这些微小的动物具有如此惊人的多样性，不论是人体肠道，还是海底世界都充斥着它们的身影，但在尔后有了DNA的跨时期发现，微生物就不再是研究的宠儿了，不过仍然有很多科学家继续进行对其各种行动的研究。

文献来源：Real-timebioluminescenceimagingofmixedmycobacterialinfections.

包括细菌在内的微生物研究常常需要追踪和分析这些生物的动态行动，时至本日这些技术已得到了长足发展，出现了1些新的工具，如荧光蛋白报告基因，经典技术也取得了新生，如琼脂糖平板上细菌菌落复杂漩涡和螺旋形生长的定量分析等。同时在过去的210年里，显微镜又东山再起，通过1些小型，相对便宜的相机，和日趋复杂的图象分析工具帮助科学家们完成了许多分析研究。

TheScientist杂志汇总了1些创新方法，和经典方法的升级版。

感染期少许细菌如何检测

许多病原菌，比如结核杆菌在初始生长阶段生长的10分缓慢，因此要了解其如何感染宿主的其实不容易。至今科学家们还不清楚结核分枝杆菌Mycobacteriumtuberculosis在人体内的立足点在哪里，是肺泡？鼻咽？还是散布在全身的病原体？

“如果能在体内追踪到这些病原体，就是这1领域的1大进步，”来自德州A&M健康科学中心的微生物病理学和免疫学教授JeffreyCirillo说。

为了能找到样品中少许的结核杆菌的踪影，Cirillo研究组研发了1种新技术，利用荧光报告基因来检测——结核杆菌会分泌1种名为BlaC的酶，据此研究人员设计出1种能与这类酶反应的分子，两者反应后会发出荧光。在此基础上制成的检测装置只需在其中加入痰液，若含有结核杆菌，检测装置就会发出荧光。如果自行检测者拿不准如何判断荧光，如何检测感染细菌数目，可用手机拍照后传给专业医生，没必要亲身到医院就能够获知检测结果。

这类新型检测方法灵敏度很高，样本中只含少许的结核杆菌就可以检测出来，如何检测感染细菌数目。与之相比，传统的利用显微镜视察样本中是不是含结核杆菌的方法，在结核杆菌数量很少经常常判断困难。

其实之前也有类似的技术，但所用分子不只对结核杆菌敏感，也会引发其他1些种类的细菌产生反应。而这1研究针对这1问题进行改进，所用分子只有遇到结核杆菌分泌的酶时才发出荧光。

这1系统能检测到样品中少至10个细菌（AngewChemIntEdEngl，如何检测感染细菌数目,53:9360⑹4,2014），Cirillo还在尝试研发另外的生物萤光分子（来自萤火虫）追踪活体动物中的感染的新系统。

这1报告系统是在其它研究发现的基础上研发出来的，Cirillo研究组进行了1些改动，从Addgene开放性数据中可以活动这类质粒的信息。