用分子检验识别急性移植排异反应

肾移植的急性排异(AR)增大了移植肾慢性损伤和衰竭的风险，所以急需无创分子测定来改进疾病诊断和病人监护。

BioMarkHD和EP1平台具有数字阵列集成流控电路，可实现定量实时聚合酶链反应

虽然用了免疫抑制疗法，大约15%到20%的肾移植患者仍会产生急性排异，用分子检验识别急性移植排异反应，血清肌酐是肾功能的标记物，它水平的升高常常预示着排异，然落后行肾活组织检查，确认是不是产生了排异。

美国加利福尼亚大学旧金山分校的科学家与来自多国的科学家合作，在2005年至2012年间搜集了美国、墨西哥和西班牙的8座肾移植中心438名成人和儿童肾移植患者的558份外周血样本，以开发定量实时聚合酶链反应(qPCR)检验产品。他们用急性排异或无急性排异（由肾活组织检查肯定）成人的143份样本开发了这类检验产品，然后用3组患者完成并确证该检验产品。

用基于柱方法的试剂盒提取总核糖核酸(RNA)，在安捷伦科技公司(SantaClara,CA,USA)的2100生物分析仪上用RNA6000纳米芯片实验室试剂盒丈量RNA完全度。在96.96动态阵列和芯片上履行微流控qPCR，通过HXIFC控制器预先加载该芯片并在Fluidigm公司(SouthSanFrancisco，用分子检验识别急性移植排异反应,CA，用分子检验识别急性移植排异反应,USA)的BioMarkqPCR平台上实行qPCR。

科研小组评估了43个基因中10个基因的差异表达，选择已确证的一样10个基因作为标记物，用标准化的临床实验样本搜集和处理程序诊断外周血中急性排异的。为了提高143份成人样本的急性排异诊断准确度，用多种统计建模方法又找到7个基因，提高了基因组合鉴别急性排异与非急性排异常本的准确度，所以终究的选择是17个基因。该测定名为kSORT，能辨别急性排异风险高和风险低的患者。不管任何年龄、移植后经过的时间和样根源，kSORT测定都能够检测血液中的急性排异，无需额外的数据归1化。

该研究的论文发表于2014年11月11日的《公共科学图书馆》杂志《医学》分册上。作者总结说，kSORT测定是1种简单、稳定、可用于临床的血液检验。他们正在用kSORT进行1项前瞻性视察实验和另外一项前瞻性随机双盲临床干预实验，以肯定移植后如何继续利用kSORT，辅助现有的临床规程指南分类病人的免疫风险、药物载荷和活检要求。