LAMP测定检测阴道毛滴虫

阴道毛滴虫感染最常常使用的诊断化验有：湿片显微镜检、培养和最近使用生殖道拭子、尿液样本或精液样本的核酸扩增检验(NAAT)，LAMP测定检测阴道毛滴虫。培养是诊断阴道毛滴虫的金标准，虽然其灵敏度可能和显微镜检1样低，需要最少孵育1周且每天做显微镜检才能到达比较好效果。

1只阴道毛滴虫滋养体的扫描电子显微图象(SEM)

1种环介导恒温扩增(LAMP)测定产品靶向重复的DNA品种特异的序列，其设计用处是检测阴道毛滴虫。

位于马尼拉的菲律宾大学的寄生虫学家搜集了16份生殖道拭子和两份尿样，样本来自前来生殖健康中心救治的妇女，LAMP测定检测阴道毛滴虫。通过离心制成对数中期无菌阴道毛滴虫培养物（107毛滴虫/毫升）和1毫升等分的临床样本，LAMP测定检测阴道毛滴虫。通过聚合酶链反应(PCR)检查所有样本，看是不是存在阴道毛滴虫。

基于高度重复的两千碱基对(2-Kbp)阴道毛滴虫DNA片断设计特异于阴道毛滴虫的LAMP引物。用凝胶电泳评估LAMP产物的浊度，并加入英杰公司(Carlsbad,CA,USA)的SYBRSafeDNA凝胶染料，在UVP公司(Upland,CA,USA)的紫外透照器下显像。自然光下色采从橙色变成粉红或在紫外透照器下从暗色变成荧光信号表示阳性反应。

16份生殖道拭子样本中的15份PCR结果为阴性，两份尿液样本结果也为阴性。把所有的阴性样本混为1体，用于做分析灵敏度评估时掺杂，LAMP测定检测阴道毛滴虫。搀杂的生殖道拭子样本的结果说明LAMP方法的检测限是100毛滴虫/毫升，采取的手段是凝胶电泳、浊度或加入SYBRSafe，而PCR的检测限是103毛滴虫/毫升。阴道毛滴虫LAMP与口腔毛滴虫和人5毛滴虫等密切相干的毛滴虫和溶组织内阿米巴、白色念珠菌、大肠杆菌、绿脓杆菌和金黄色葡萄球菌等其它肠道微生物和泌尿生殖道微生物的DNA提取物不产生交叉反应。